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細(xì)菌轉(zhuǎn)化是受體細(xì)菌以低頻率從環(huán)境中吸收外源DNA的天然過程，經(jīng)轉(zhuǎn)化后的細(xì)菌可表達(dá)相應(yīng)的遺傳形狀，是遺傳多樣性的來源之一，也可能為宿主細(xì)菌帶來額外的好處（如抗生素抗性）。感受態(tài)細(xì)胞是通過物理或化學(xué)方法進(jìn)行誘導(dǎo)，使其處于最適攝取或容納外源DNA的生理狀態(tài)，可高效吸收環(huán)境中的DNA分子。那么你知道該如何選擇合適的感受態(tài)細(xì)胞嗎？讓我們一起來看看吧！感受態(tài)細(xì)胞常用于分子克隆中，用于復(fù)制增殖重組DNA分子。但感受態(tài)細(xì)胞多種多樣，當(dāng)選擇感受態(tài)細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)化時(shí)，需要考慮多種因素，如轉(zhuǎn)化方式、轉(zhuǎn)...

原代細(xì)胞培養(yǎng)也叫初代培養(yǎng)，是建立細(xì)胞系的第一步，其步驟包括取材→分離→培養(yǎng)和維持。那么你知道原代細(xì)胞培養(yǎng)的常見問題有哪些嗎？讓我們一起來看看吧！一、倍增和代數(shù)有什么區(qū)別倍增是培養(yǎng)物中細(xì)胞總數(shù)的翻倍，通常是指細(xì)胞指數(shù)或?qū)?shù)生長(zhǎng)期。代數(shù)是指細(xì)胞群從培養(yǎng)瓶中移出，傳代培養(yǎng)過程的次數(shù)，傳代培養(yǎng)的目的，是使細(xì)胞處于低密度以刺激其進(jìn)一步生長(zhǎng)。二、接收到的凍存細(xì)胞該如何處理收到包裝箱后，立即將凍存細(xì)胞從干冰移入液氮中凍存。此過程盡量快，以避免升溫。不要將細(xì)胞儲(chǔ)存在-80℃，這樣會(huì)對(duì)細(xì)胞造成...

免疫共沉淀（CO-IP）是以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎(chǔ)的用于研究蛋白質(zhì)相互作用的經(jīng)典方法。那么你知道免疫共沉淀實(shí)驗(yàn)操作有哪些嗎？讓我們一起來看看吧！一、蛋白樣品制備裂解提取出免疫沉淀需要的蛋白樣品，以下為HEK293T細(xì)胞樣品的處理方法，其余的樣品制備方法參閱相關(guān)文獻(xiàn)。單層貼壁細(xì)胞總蛋白的提取：1.收集細(xì)胞：10cm細(xì)胞培養(yǎng)板上，每板細(xì)胞加1ml，4℃預(yù)冷的PBS（0.01MpH7.2～7.3）。反復(fù)沖洗把所有掛壁細(xì)胞洗下來轉(zhuǎn)移到1.5ml離心管內(nèi)離心：3400rpm2...

相當(dāng)多的蛋白質(zhì)行使功能的時(shí)候并不是單打獨(dú)斗的，蛋白質(zhì)們通過蛋白質(zhì)相互作用形成復(fù)合體然后進(jìn)行工作。因此，研究蛋白質(zhì)的相互作用成為研究蛋白質(zhì)功能和作用機(jī)制的最為重要的環(huán)節(jié)之一。那么你知道研究蛋白質(zhì)相互作用的方法有哪些嗎？讓我們一起來看看吧！一、酵母雙雜交系統(tǒng)原理：很多真核生物的位點(diǎn)特異轉(zhuǎn)錄激活因子通常具有兩個(gè)可分割開的結(jié)構(gòu)域，即DNA特異結(jié)合域（DNA-bindingdomain,BD）與轉(zhuǎn)錄激活域（Transcriptionalactivationdomain,AD）。這兩個(gè)結(jié)...

優(yōu)質(zhì)的試劑，良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠的必要條件。ELISA的操作因固相載體的形成不同而有所差異，那么你知道ELISA實(shí)驗(yàn)的操作要點(diǎn)有什么嗎？讓我們一起來看看吧！一、標(biāo)本的采取和保存可用作ELISA測(cè)定的標(biāo)本十分廣泛，體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標(biāo)本以測(cè)定其中某種抗體或抗原成份。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測(cè)定(如血清、尿液)，有些則需經(jīng)預(yù)處理(如糞便和某些分泌物)。大部分ELISA檢測(cè)均以血清為標(biāo)本。血漿中除尚含有纖維蛋白...