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022-66387942簡要描述:SIM SF Expression Medium培養(yǎng)基為澄清淡黃色透明液體,如果一旦發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基變得渾濁或出現(xiàn)沉淀,請勿使用。
培養(yǎng)基特點(diǎn):
SIM SF Expression Medium培養(yǎng)基為澄清淡黃色透明液體,如果一旦發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基變得渾濁或出現(xiàn)沉淀,請勿使用。
保存條件:
2~8℃避光保存,一旦過期,請勿使用。
穩(wěn)定性及保質(zhì)期:
室溫下一個(gè)星期內(nèi)穩(wěn)定。
自收到之日起, 2~8℃避光保存,六個(gè)月內(nèi)穩(wěn)定。
細(xì)胞凍存:
選擇處于對數(shù)生長期的細(xì)胞,保證活率大于90%。
制備細(xì)胞凍存液:45%新鮮培養(yǎng)基,45%條件培養(yǎng)基,10%DMSO。
200g離心5分鐘,棄去上清。
用細(xì)胞凍存液重懸細(xì)胞,細(xì)胞凍存密度為1.2~2×107/ml/ml。
迅速轉(zhuǎn)移重懸的細(xì)胞至無菌的凍存管中,每管1~2ml。
將凍存管放入程序降溫盒中,-70℃冰箱放置過夜。
若凍存細(xì)胞需要長期保存,將其轉(zhuǎn)移至液氮罐中。
細(xì)胞復(fù)蘇:
將凍存管迅速轉(zhuǎn)移至27℃水浴中,進(jìn)行融化。
將融化的細(xì)胞轉(zhuǎn)至無菌的含5-10ml新鮮培養(yǎng)基的無菌離心管中。
200g低速離心5分鐘,緩慢倒掉上部培養(yǎng)基,不要將沉降的細(xì)胞懸起。
用10-20ml新鮮培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,確保重懸后的細(xì)胞密度大于1×106/ml左右。
將重懸的細(xì)胞放入無菌培養(yǎng)瓶中,旋蓋擰松,放在搖床中懸浮培養(yǎng)。
當(dāng)細(xì)胞密度生長達(dá)到2~4×106/ml時(shí),可以進(jìn)行傳代,傳代時(shí)細(xì)胞接種密度為0.8-1×106/ml。