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022-66387942簡石瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒TD407代理——天津益元利康生物科技有限公司。
一、產品優(yōu)點:
1. 從瓊脂糖凝膠中快速(15分鐘)高產量地回收超純的DNA;
2. 特制的微量柱設計使得DNA可以在高濃度下洗脫到最小體積(≥10 µl);
3. 洗脫的DNA非常適合用于DNA連接、測序、標記、PCR等應用。
二、操作使用:
(以下離心操作步驟的離心力均在10,000 - 16,000 x g之間進行)
簡石DNA回收試劑盒操作步驟一:
使用刀片或手術刀把DNA片段從瓊脂糖凝膠上切除下來并且移置到 1.5 ml 小型離心管內。注意: 從凝膠上切下的瓊脂糖盡可能的要少。
簡石DNA回收試劑盒操作步驟二:
將3倍體積的ADB溶膠液 添加到每1體積從凝膠上切下的瓊脂糖切塊中。例如: 對于100 µl (mg) 的瓊脂糖凝膠切塊,添加300 µl的ADB緩沖液。
簡石DNA回收試劑盒操作步驟三:
在37-55℃下溫水浴10分鐘直到凝膠切塊完quan溶解。注意:確定凝膠切塊完quan溶解是很重要的步驟,在溫水浴過程中可輔以溫和的攪拌有助于凝膠的溶解。如果DNA大小超過8kb,加熱之后需要額外添加等量膠塊體積的水。 例如:100 µl (mg) 的瓊脂糖凝膠切塊,添加300 µl的ADB緩沖液,加熱之后添加100µl的水。
簡石DNA回收試劑盒操作步驟四:
溶解的瓊脂糖切塊溶液放到1號C中并把柱套在收集管里。
簡石DNA回收試劑盒操作步驟五:
離心1分鐘后,倒掉過濾液。注意:柱所能容納的樣品體積為800 µl,所以,如果樣品體積超過800 µl時,柱就要被多次填充和離心。
簡石DNA回收試劑盒操作步驟六:
添加200µl的DNA洗滌液到柱中離心1分鐘,去除濾出液。
簡石DNA回收試劑盒操作步驟七:
重復第6步洗滌步驟。
簡石DNA回收試劑盒操作步驟八:
可選步驟:將收集管中的廢液倒掉,并將1號C套回收集管中額外離心2分鐘,盡量除去洗滌液,以免洗滌液中殘留乙醇抑制下游反應。
簡石DNA回收試劑盒操作步驟九:
直接添加10 µl DNA洗脫液到柱基質中,將柱套在1.5 ml離心管中離心1分鐘來洗脫DNA。注意:從柱中洗脫出的DNA產量與pH和溫度有關。如果使用水來洗脫,確保pH是 >6.0。在向柱中加入水后靜置1分鐘可增加較大 (> 6 kb) DNA 的產量。在60-70℃的水中洗脫DNA可增加較大DNA (> 10 kb)的產量。
注意:如果試驗需要的話,TE緩沖液 (10mMTris-HCl ,1mM EDTA,pH8.0) 或改進的TE(10mM Tris-HCl,0.1mMEDTA,pH8.5) 也可用來洗脫。
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