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022-663879421.簡介
CM SepFast 6HF是一組弱陽離子交換介質(zhì)。該離子交換層析介質(zhì)特別適用于生物分子的一般大規(guī)模純化,其中不純組分與目標(biāo)分子層析分離。
CM SepFast 6HF在配體密度、負(fù)載量和單個組分的分離能力之間進(jìn)行了平衡設(shè)計,適用于大規(guī)模生物制造應(yīng)用。
CM SepFast 6HF的基質(zhì)由高度交聯(lián)的 6%瓊脂糖制成,具有優(yōu)異的流動性。它對生物加工行業(yè)中遇到的大多數(shù)化學(xué)條件都非常穩(wěn)定。
2. 產(chǎn)品特性
表1 CM SepFast 6HF的特性
CM SepFast 6HF | |
基質(zhì) | 高度交聯(lián)的6%瓊脂糖接枝葡聚糖 |
功能配體 | 羧甲基弱陽離子 |
總離子容量 | 0.08-0.13 mmol/ml |
動態(tài)結(jié)合容量* | >110 mg lysozyme/ml |
粒徑 | 50 - 150 µm |
壓力-流速特性** | >500 cm/hr at 3 bar |
操作壓力 | Up to 3 bar |
pH穩(wěn)定性 | 2-14 (短期),4-12 (長期) |
工作溫度 | 4℃-30℃ |
化學(xué)穩(wěn)定性 | 所有常用的緩沖液;1 M乙酸、1 M NaOH、6 M鹽酸胍、8 M 尿素、30% 異丙醇、70% 乙醇 |
注意事項 | 避免氧化劑和陽離子洗滌劑 |
保存 | 20% 乙醇 |
*測試條件:10 mM緩沖液 pH 7.5,上樣5 mg/ml 蛋白質(zhì),停留時間5分鐘,50%穿透。
**在 32 mm內(nèi)徑色譜柱中,床高 15 cm,室溫下用水測量。
圖1 IEX SepFast Media的壓力-流動特性
(備注:將基礎(chǔ)基質(zhì)填充到32 mm內(nèi)徑的柱子中,最終床?為15 cm。流動相是去離子水。測試在室溫下進(jìn)行)
圖2 滴定曲線
3.方法優(yōu)化
建議在載量、流速、結(jié)合pH值、結(jié)合離子強(qiáng)度、洗脫速度和梯度等參數(shù)之間進(jìn)行篩選。由于CM SepFast 6HF的快速孔隙可及性,結(jié)合步驟可以在比洗脫步驟更快的流速下完成。建議特別注意優(yōu)化洗脫條件以獲得最佳分離能力。
強(qiáng)離子交換介質(zhì)可以在較寬的pH范圍內(nèi)保持其電荷(并因此保持其功能),而弱離子交換介質(zhì)的離解程度和離子交換容量隨pH值而變化。因此,如果使用弱離子交換介質(zhì),優(yōu)化pH值更為關(guān)鍵。
通常在優(yōu)化方法時,平衡組分分離度與工藝產(chǎn)量是主要考慮因素。此外,對于不穩(wěn)定或對剪切力敏感分子的純化,需要優(yōu)化操作條件以平衡產(chǎn)量和對目標(biāo)分子可能造成的損害。
4.裝柱
CM SepFast 6HF由高度交聯(lián)的珠狀瓊脂糖制成,具有出色的機(jī)械強(qiáng)度。該介質(zhì)可以很容易地以任何可能的填充方式填充到任何類型的色譜柱中。典型的包裝壓力高達(dá)3 bar。
5.保養(yǎng)
根據(jù)不同的應(yīng)用,介質(zhì)可能會被多次使用。如需重復(fù)使用,請參閱以下說明。
(1)再生
每次運(yùn)行后,用高離子強(qiáng)度溶液(例如1M NaCl緩沖液)或增加pH 值。
(2)就地清洗 (CIP)
CIP是一種去除強(qiáng)結(jié)合物質(zhì)的程序,例如再生后殘留在吸附劑表面的脂質(zhì)、內(nèi)毒素和變性蛋白質(zhì)。定期 CIP 可防止污染物在填充床中積聚,并有助于保持色譜柱性能。
應(yīng)根據(jù)存在的污染物類型為每個過程制定具體的 CIP程序。CIP 的頻率取決于各個應(yīng)用的性質(zhì)。
以下信息可作為一般指導(dǎo)。
濃度高達(dá)2 M的鹽可用于清除因離子相互作用而結(jié)合的雜質(zhì)。疏水性結(jié)合的污染物可以通過以下試劑去除:1 M NaOH、低比例的非離子洗滌劑(例如0.1-2%)、堿性或酸性條件下的30% 異丙醇(例如在乙酸或磷酸存在下)。也可以探索上述試劑的組合。一般來說,孵育時間應(yīng)該更長(例如從 30 min到2 h),以確保污染物WAN全解離。
(3)消毒
建議使用0.5?1.0 M NaOH接觸1 h進(jìn)行消毒。
6.儲存
CM SepFast 6HF應(yīng)儲存在20%乙醇中(強(qiáng)陽離子交換介質(zhì)含有0.2 M NaAC)以防止微生物生長。將介質(zhì)存儲在4℃到30℃的溫度下。使用前,用至少5倍體積的運(yùn)行緩沖液來平衡介質(zhì)。
7.更多信息
了解更多關(guān)于BioToolomics產(chǎn)品代理信息請聯(lián)系天津益元利康科技有限公司。
8.訂購信息
產(chǎn)品 | 規(guī)格 | 貨號 |
CM SepFast 6HF | 25 ml | 452301-25ML |
100 ml | 452301-100ML | |
500 ml | 452301-500ML | |
1 litre | 452301-1L | |
5 litre | 452301-5L | |
10 litre | 452301-10L | |
CM SepFast 6HF Plus | 25 ml | 453301-25ML |
100 ml | 453301-100ML | |
500 ml | 453301-500ML | |
1 litre | 453301-1L | |
5 litre | 453301-5L | |
10 litre | 453301-10L | |
CM SepFast Large Bead | 25 ml | 440701-25ML |
100 ml | 440701-100ML | |
500 ml | 440701-500ML | |
1 litre | 440701-1L | |
5 litre | 440701-5L | |
10 litre | 440701-10L | |
CM SepFast Large Bead Plus | 25 ml | 440801-25ML |
100 ml | 440801-100ML | |
500 ml | 440801-500ML | |
1 litre | 440801-1L | |
5 litre | 440801-5L | |
10 litre | 440801-10L | |
CM SepFast HighRes | 25 ml | 471101-25ML |
100 ml | 471101-100ML | |
500 ml | 471101-500ML | |
1 litre | 471101-1L | |
5 litre | 471101-5L | |
10 litre | 471101-10L | |
CM SepFast HighRes Plus | 25 ml | 471201-25ML |
100 ml | 471201-100ML | |
500 ml | 471201-500ML | |
1 L | 471201-1L | |
5 L | 471201-5L | |
10 L | 471201-10L |