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淺析流式細(xì)胞分選抗體選擇的基本條件

 更新時(shí)間:2022-10-24    點(diǎn)擊量:1657
  流式細(xì)胞分選抗體選擇的基本條件:目標(biāo)蛋白特異性,反應(yīng)種屬以及應(yīng)用實(shí)驗(yàn)。流式抗體熒光標(biāo)記的方式包括直接標(biāo)記和間接標(biāo)記兩種。在流式實(shí)驗(yàn)過程中,盡量減少實(shí)驗(yàn)工序和過程,以保證實(shí)驗(yàn)的真實(shí)和準(zhǔn)確性。因此在條件允許的范圍內(nèi),建議盡量用直接標(biāo)記的抗體進(jìn)行實(shí)驗(yàn)而不去做間接標(biāo)記。
 
  如果同時(shí)檢測(cè)多個(gè)指標(biāo):確認(rèn)流式細(xì)胞儀能檢測(cè)多少個(gè)通道,流式抗體每個(gè)通道只能選擇1種熒光素。各個(gè)通道之間的熒光素可以隨意搭配。如實(shí)驗(yàn)者同時(shí)檢測(cè)三個(gè)指標(biāo),可以適當(dāng)?shù)倪x擇一個(gè)熒光素標(biāo)記,F(xiàn)ITC、PE和PE-cy5。切忌所有指標(biāo)選擇同一個(gè)通道的熒光標(biāo)記,以防止熒光的重疊和相互干擾,影響結(jié)果。因此,流式細(xì)胞儀的通道越多,同一份樣本能同時(shí)做的表面/胞內(nèi)標(biāo)志就越多。
 
  流式細(xì)胞分選抗體使用注意事項(xiàng):
 
  1.流式使用申請(qǐng)者可提前5天電話預(yù)約或者到中山大學(xué)醫(yī)學(xué)院科技樓北806預(yù)約,至少提前一天預(yù)約。
 
  2.預(yù)約時(shí)說明:制備的樣品細(xì)胞的種類、細(xì)胞的大小、熒光標(biāo)記的情況(幾種熒光染色,熒光染料的激發(fā)波長和發(fā)射波長,需要的目的細(xì)胞)
 
  3.樣品請(qǐng)按時(shí)制備好,如果超過預(yù)約時(shí)間20min還沒制備好,則取消本次預(yù)約時(shí)間段的使用,或者由下一個(gè)客戶頂上。
 
  4.每天預(yù)約的客戶要提供無菌的生理鹽水,生理鹽水的提供量我們會(huì)根據(jù)客戶的樣品數(shù)確定。
 
  5.對(duì)于細(xì)胞分選的用戶需提供樣品收集的流式管(Cat:352054),流式管中裝上4/5體積的培養(yǎng)基。
 
  6.流式使用完成后,用戶清理實(shí)驗(yàn)過程中用完的物品,以保持流式房的衛(wèi)生。
 
  7.Copy數(shù)據(jù)時(shí),請(qǐng)自帶光盤(CD/DVD),嚴(yán)禁未經(jīng)允許使用優(yōu)盤拷數(shù)據(jù)。
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